液相可用于低压梯度洗脱

②氦气鼓泡脱气法：向流动相中吹入氦气，高效把溶解在流动相中的液相空气携带出。该方法每年大约要消耗掉一瓶高纯氦气，色谱成本偏高，高效但脱气效果好，液相可用于低压梯度洗脱。色谱在0.5MPa的高效压力下，先以100mL/min，液相鼓泡15min，色谱然后以20～30mL/min维持。高效

③高效液相色谱仪配备流动相在线脱气装置：它属于合成树脂膜过滤器。液相溶解在流动相中的色谱气体可以从膜中被真空脱出，而液体不会从膜中出来。高效脱气效果最好。液相

(3)高压输液泵：由于高效液相色谱柱中填料颗粒较细，色谱通常为5～10μm，而且致密。这样通过色谱柱的流动相会受到很大的阻力，为缩短分析时间，必须使用高压泵，向色谱柱提供流量稳定、重现性好的流动相。对高压输液泵的要求，一是流量稳定，输出的流动相脉冲小，流量精度和重复性优于0.3％；二是流量范围宽，分析型为0.1～10mL/min范围内连续可调且容易调节，适应微柱的高压泵最小体积流量为0.01mL/min，制备型色谱仪所用高压输液泵最大流速可达100mL/min；三是输出压力高，密封性能好，最高输出压力可达40～50MPa；四是泵液缸体积小，方便更换流动相，减少系统平衡时问；五是耐腐蚀性好，多用不锈钢、聚四氟乙烯材料制造，也有用精密陶瓷的，泵的活塞多采用石英杆，单向阀通常是人造红宝石或蓝宝石；六是具有等度和梯度洗脱功能，噪声低且具有安全过压保护装置；七是易于维护和维修。

商品高压输液泵有恒流、恒压两种类型。恒流泵使输出的液体流量稳定，而恒压泵使输出的液体压力稳定。恒流泵有往复式柱塞泵和注射泵，恒压泵有气动放大泵。在色谱实际分析操作中，色谱柱系统的阻力由于某些原因可能有所变化，因此恒流泵比恒压泵更优越，组分的保留时间相对稳定。在目前高效液相色谱仪上采用最多的是并联双泵头往复式柱塞泵。工作时电动机带动偏心轮转动，偏心轮驱动活塞在液缸内往复运动。柱塞向后运动时，液缸内形成真空，这时溶液出口单向阀关闭，流动相在大气压力或正压下自溶剂进口单向阀进入液缸。柱塞向前运动时，单向阀动作反向，达到一定压力时，流动相自溶剂出El单向阀压出到色谱柱。如此循环往复，使流动相连续进入色谱柱。当柱塞往复运动加快时，提供的流速加大，反之就小。因为在泵处于吸液冲程时没有输出，流动相流量的脉动将使仪器无法正常工作，所以多采用双柱塞和加脉动阻尼器来减少脉动。增加柱塞，脉动减小，流量更平稳，但泵成本高，故障率也高。若想让柱塞泵正常工作，一个很重要的条件就是液缸内不能进入气泡或进入后及时排出。柱塞密封垫(亦称泵封)是易损件，当泵漏液时必须更换。

压力表示单位比较多，我国目前法定采用的标准压力单位为Pa。

(4)梯度洗脱装置：在分析过程中，两种或以上的溶剂作为流动相的比例不发生变化的洗脱模式称为等度洗脱。等度洗脱的优点是色谱柱始终处于平衡状态，分析周期短，能连续进样，组分保留时间重现性好；其不足是可能存在有些组分短时间内无法洗脱出来，因此需要定期用100％乙腈或甲醇将色谱柱彻底冲洗干净。所谓梯度洗脱，就是将两种或两种以上不同极性的溶剂进行混合，作为流动相使用。进样后，连续不断地按拟定的程序改变流动相的配比，使洗脱能力逐渐变化。由于流动相极性发生变化，使得选择性得以改善，因而提高了分辨能力，缩短了分离时间。常用的梯度洗脱方式有低压梯度洗脱和高压梯度洗脱。高压梯度装置是用高压泵分别将两种或三种不同极性的溶剂输入混合器，充分混合后进入色谱柱。

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